Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pemberian ekstrak daun mimba dalam mengendalikan hama ulat grayak dan interval waktu yang tepat untuk mengaplikasikannya pada tanaman tembakau. Penelitian ini dilaksanakan di Kebun Percobaan Fakultas Pertanian Universitas Jabal Ghafur dimulai pada tanggal 22 Juli hingga 17 September 2020. Penelitian ini menggunakan Rancangan Acak Kelompok (RAL), pola faktorial, ada dua faktor yang diteliti yaitu konsentrasi ekstrak daun mimba dan periode aplikasinya. Faktor ekstrak daun mimba terdiri dari M1 (15%), M2 (30%), M3 (45%) dan faktor interval waktu aplikasi terdiri dari W1 (2 hari setelah investasi), W2 (4 hari setelah investasi) W3 (6 hari setelah investasi). Parameter yang diamati yaitu intensitas kerusakan daun tembakau dan mortalitas ulat grayak. Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak daun mimba berpengaruh sangat nyata terhadap mortalitas ulat grayak pada umur tanaman 27 HST, berpengaruh nyata umur 25 HST, dan berpengaruh tidak nyata pada umur 23 HST. Ekstrak daun mimba tidak berpengaruh nyata terhadap intensitas kerusakan daun tembakau umur 23, 25, dan 27 HST. Interval waktu aplikasi ekstrak daun mimba berpengaruh sangat nyata terhadap mortalitas ulat grayak umur 23 dan 25 HST dan berpengaruh nyata umur 27 HST. Interval waktu aplikasi berpengaruh tidak nyata terhadap intensitas kerusakan daun tembakau pada umur 23, 25 dan 27 HST. Tidak terdapat interaksi yang nyata antara konsentrasi ekstrak daun mimba dan interval waktu aplikasi terhadap semua parameter yang diamati.

Kata kunci : Ekstrak Daun Mimba, Interval Waktu Aplikasi, Tembakau.